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第一節 抗腫瘤作用
靈芝對實驗動物的移植性腫瘤具有顯著的抑制作用。
Sasaki等(1971)發現,從樹舌子實体中分离出的多糖成分G—Z對小鼠肉瘤S180有抑制作用,抑制率為54.7%。隨后,Ohtsuka等(1976)、Hitoshi等(1977)、佐藤等(1977)亦先后報告,鐵杉靈芝(Ganoderma tsugae)和島靈芝(Ganoderma boninense)菌絲体所含多糖、靈芝中提取出的四种含少量蛋白質的多糖、赤芝熱水提取物對小鼠肉瘤S180均有顯著抑制作用。Maruyama等報告,腹腔注射或灌胃赤芝水提物對小鼠肉瘤S180均有抗种瘤作用,而醇溶部分無效。分子量大于10 000者有效,小于10 000者無效。Kim等(1981)也報告,從朝鮮產靈芝中提取的一种由4种單糖和18种氨基酸組成的多糖和蛋白質的混合物可抑制小鼠肉瘤S180的生長,抑瘤率達87.6%,其中三分之一小鼠的腫瘤完全消退。
Kang等(1981)發現,從靈芝菌絲体中提取出的一种蛋白多糖不僅可抑制小鼠肉瘤S180生長,而且腹腔注射5d后,經羊紅細胞(SRBC)免疫的小鼠脾臟空斑形成細胞(PFC)數較對照組顯著增加,表明此多糖可提高荷瘤小鼠的免疫功能。
高斌等(1989)用從樹舌子實体中提取的樹舌多糖研究了其抑瘤作用和机制,結果發現,樹舌多糖可降低小鼠荷瘤率,減輕瘤重。并認為其抑瘤作用可能与增強体內自然殺傷細胞(NK)活性和促進T輔助細胞Th)產生白細胞介素質2(IL-2)、γ-干扰素有關。
李旭生等証明,靈芝菌絲体提取物(GLP)對C3H小鼠的肌纖維惡性腫瘤有明顯的抑瘤作用,而且對肺部轉移病灶亦有抑制作用。体外試驗時,GLP對P3HR-1細胞与腦膜瘤細胞亦有抑制作用。隨后,他們進一步証明,靈芝菌絲体酒精萃取的不溶性物(GL-AI)可能增強正常小鼠和荷瘤小鼠脾臟自然殺傷細胞(NK)的殺傷活性。且無論口服、腹腔注射或靜脈注射均有效。腹腔注射40mg/kg有GL-AI15h后即顯著增強自然殺傷細胞的殺傷活性,48h達高峰,作用可維持96h。GL-AI在增強自然殺傷細胞的活性同時,亦促進小鼠干扰素的產生。
蔡宗統(1991)指出,三种台灣產靈芝(無柄靈芝、古梅靈芝、猴板凳)水提液經灌胃給藥后,在預防癌症發生模式、癌症初期治療模式、癌症后期治療模式中,均有抑瘤效果。
Toth等(1983)報告,從赤芝菌絲体中提取的六种三 類細胞毒物質(ganoderic acid U,V,W,X,Z),在体外明顯抑制肝肉瘤(HTC)細胞生長。
以上結果証明靈芝具有抗腫瘤作用,而靈芝多糖是其抗腫瘤作用的主要有效成分,其抗腫瘤作用机制可能是宿主中介性的,即通過增強机体免疫功能而實現。
第二節 免疫調節作用
一、提高机体的非特异性免疫功能 我們曾觀察了從靈芝子實体中提取的靈芝液和靈芝多糖D6對小鼠腹腔巨噬細胞吞噬活力的影響。結果証明,靈芝液和靈芝多糖D6均能明顯提高小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅血球的能力,吞噬百分率和吞噬指數均較對照組為高。我們還發現,從松杉樹芝(鐵杉靈芝)子實体和菌絲体中提取的多糖能恢复小鼠因注射氫化可的松而降低的靜脈注射的碳粒廓清速率。
顧立剛等(1990)的實驗証明,從薄蓋靈芝菌絲体提取制成的注射液(簡稱薄芝液)与小鼠腹腔巨噬細胞在体外培養24h后,在劑量适宜時(5∼20μl/ml)可增加巨噬細胞對中性紅的吞噬功能,并增加巨噬細胞內溶菌 的含量。此外,薄芝液還能協同LPS增強巨噬細胞分泌白細胞介素1(IL-1)的能力。
高斌等(1989)亦証明,樹舌多糖在体外亦能促使巨噬細胞分泌IL-1樣物質。
第二節 免疫調節作用
一、提高机体的非特异性免疫功能 我們曾觀察了從靈芝子實体中提取的靈芝液和靈芝多糖D6對小鼠腹腔巨噬細胞吞噬活力的影響。結果証明,靈芝液和靈芝多糖D6均能明顯提高小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅血球的能力,吞噬百分率和吞噬指數均較對照組為高。我們還發現,從松杉樹芝(鐵杉靈芝)子實体和菌絲体中提取的多糖能恢复小鼠因注射氫化可的松而降低的靜脈注射的碳粒廓清速率。
顧立剛等(1990)的實驗証明,從薄蓋靈芝菌絲体提取制成的注射液(簡稱薄芝液)与小鼠腹腔巨噬細胞在体外培養24h后,在劑量适宜時(5∼20μl/ml)可增加巨噬細胞對中性紅的吞噬功能,并增加巨噬細胞內溶菌 的含量。此外,薄芝液還能協同LPS增強巨噬細胞分泌白細胞介素1(IL-1)的能力。
高斌等(1989)亦証明,樹舌多糖在体外亦能促使巨噬細胞分泌IL-1樣物質。
二、增強机体体液免疫功能
我們曾以羊紅細胞(SRBC)誘導的小鼠空斑形成細胞(PFC)反應為指標,觀察几种靈芝多糖對正常小鼠和各种誘因所致免疫功能抑制小鼠的体液免疫功能的影響。靈芝多糖BN3C(5mg/kg)連續腹腔注射5d,能顯著促進PFC反應。14月齡小鼠的PFC反應較3月齡小鼠明顯降低,靈芝多糖BN3A、BN3B和BN3C(5mg/kg)連續腹腔注射5d,可使14月齡小鼠降低的PFC反應明顯恢复(表7-1)。
表7-1 靈芝多糖BN3A、BN3B和BN3C對14月齡
小鼠空斑形成細胞(PFC)反應的影響
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鼠齡
(月) |
藥物 |
劑量
mg/(kg•d),ip |
PFC×106脾細胞 |
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3 |
對照 |
- |
2061±309 |
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14 |
對照 |
- |
864±386+++ |
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14 |
BN3A |
5×5 |
1957±392*** |
|
14 |
BN3B |
5×5 |
1792±577** |
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14 |
BN3C |
5×5 |
1405±336* |
x - ±s,n=6,+++P<0.001与3月齡對照比較,*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001与14月齡對照比較。
松杉樹芝子實体多糖(10∼100mg/kg)連續灌胃給藥4d可顯著增加小鼠抗SRBC PFC數目﹔在注射環磷 胺引起免疫功能抑制的小鼠,連續灌胃松杉樹芝子實体多糖(100mg/kg,200mg/kg)4d,能使降低的PFC反應部分恢复﹔強迫小鼠每日在冷水中游泳8∼10d,因應激可引起小鼠免疫功能顯著降低,如在應激同時給予松杉樹芝子實体多糖則可完全對抗應激所致PFC反應降低(表7-2)。從松杉樹芝菌絲体和發酵液中所獲多糖亦有類似作用。
表7-2 松杉樹芝子實体多糖對應激所致免疫功能抑制
小鼠的空斑形成細胞(PFC)反應的影響
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組別 |
劑量
mg/(kg•d),ip |
鼠數 |
PFC×106脾細胞
x - ±s |
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對照 |
- |
7 |
1222±283 |
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應激對照 |
- |
7 |
798±121** |
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松杉樹芝多糖+應激 |
25×8 |
6 |
1356±440++ |
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松杉樹芝多糖+應激 |
50×8 |
6 |
1396±349++ |
|
松杉樹芝多糖+應激 |
100×8 |
6 |
1416±518++ |
**P<0.01与對照組比較,++P<0.01与應激對照組比較。
我們還發現,每日給小鼠腹腔注射靈芝多糖GL-B(25∼100mg/kg),共4d,可明顯增強小鼠脾細胞對LPS刺激的增殖反應。當GL-B為100mg/kg時,脾細胞增殖反應較對照組增加84.8%。結果表明,GL-B可增強B淋巴細胞對LPS刺激的敏感性。
与多糖成分不同,Kino等(1991)報告,當小鼠用乙肝表面抗原(HBsAg)1μg/只免疫后,第7d開始腹腔注射靈芝蛋白LZ-812mg/kg每周兩次,直至第28d可抑制抗HBsAg抗体的產生。
三、增強机体細胞免疫功能
Nakashima等(1979)觀察了樹舌多糖對細胞免疫反應的影響。給ddy/s小鼠皮下注射甲基化的細胞α-淀粉 和不完全的Freund's佐劑(M-BaA-IFA)后,僅產生微弱的足爪腫脹反應﹔但注射甲基化細菌α-淀粉 和完全的Freund's佐劑(M-BaA-CFA)則引起明顯的足爪腫脹反應。預先給小鼠腹腔注射樹舌多糖30mg/kg,則能顯著增加(M-BaA-IFA)引起的這种遲發型過敏反應,使其反應程度可達M-BaA-CFA所致程度。但劑量增至60 mg/kg時,這种增強作用反減弱。樹舌多糖增強M-BaA-IFA誘發的遲發型過敏反應是由于激活非特异性的有擴大細胞免疫反應的T細胞(amplifier T-cells)所致。 |